В 1927 году галерея получила соседний дом по Толмачёвскому переулку (бывший дом Соколикова). По-сле перестройки в 1928 году в нём разместились администрация, научные отделы, библиотека, отдел рукописей, фонды графики. Это здание присоединялось к основному пристройкой. Церковь Николы в Толмачах, переданная Галерее в 1929 году, стала запасником живописи и скульптуры. Позже отсюда был сделан проход в заново выстроенный двухэтажный корпус с экспозиционными залами, верхний этаж которого был специально оборудован для картины А. А. Иванова «Явление Христа народу» (1837–1857).
Благодаря присоединению многих коллекций собрание живописи этого периода не уступало ни по количеству, ни по качеству экспозиции искусства второй половины XIX века. На нижнем этаже (14 залов) были выставлены работы художников рубежа XIX–XX веков и современных мастеров. Особенно широко было представлено творчество К. А. Коровина, В. А. Серова, М. А. Врубеля. В трёх последних залах демонстрировалось современное искусство.
В 1930 году была создана «Опытная комплексная марксистская экспозиция» по искусству XVIII – первой половины XIX века, в которой творчество художников прошлого попытались по-казать с точки зрения «классового истолкования явлений искусства». Картины в залах сопровож-дались фотоснимками, подробным этикетажем, их окружали предметы быта. Очевидная вульга-ризация принципов экспонирования была бессовестной профанацией музейного дела и дискреди-тировала благородные идеи основателя галереи.
Социологический подход диктовал и темы выставочной работы: «Антиалкогольная» (1929 г.), «Красная Армия в советском искусстве» (1930 г.), «Революционная и советская темати-ка» (1930 г.), «Плакат на службе пятилетки» (1932 г.).
В 1920-е годы главным считалось показать зрителю различные направления современного искусства, в 1930-е этот метод был осуждён как позиция «мнимой объективности». Началась «борьба с формализмом». Из экспозиции Галереи на 25 лет изгоняются «левые» художественные группировки 1910–1920-х годов. В её залах во всей полноте был представлен ставший господ-ствующим в искусстве метод соцреализма.
В 1932 году три новых зала связали основное здание галереи с помещением запасника в церкви Николы в Толмачах. Постройка перехода между залами, расположенными по обе стороны от главной лестницы, обеспечила непрерывность обзора. Началась работа над созданием новой концепции размещения произведений.
А четырьмя годами позже с северной стороны основного здания было закончено строитель-ство «щусевского корпуса», органично вошедшего в панораму Лаврушинского переулка. Двух-этажная постройка, созданная по проекту архитектора А. В. Щусева, была мастерски соотнесена с исторической частью и васнецовским фасадом. Его просторные залы (четыре – в верхнем этаже и четыре – в нижнем) сначала использовались для выставок, а с 1940 года были включены в основ-ной маршрут экспозиции.
В середине 1930-х годов Третьяковская галерея приняла первых посетителей, которые смог-ли познакомиться с новой экспозицией. Музей вернулся к прежнему, историко-хронологическому принципу показа своего собрания. Крупнейшие мастера, как и раньше, были представлены монографически. Тогда же, в тридцатые годы, был создан отдел советского искусства, в который регулярно передавались экспонаты после проведения грандиозных выставок современных художников, а также мастеров советских республик. Со второй половины 1930-х годов в галерее появилась традиция сопровождать выставки научными конференциями, на которые приглашались специалисты из других городов всего Советского Союза.
С первых дней Великой Отечественной войны в галерее начался демонтаж экспозиции. Картины были убраны со стен, вынуты из рам и сняты с подрамников. Музей готовился к отправке в эвакуацию.
В середине лета эшелон из 17 вагонов отправился с Казанского вокзала вглубь страны с экс-понатами не только Третьяковской галереи, но и Государственного музея нового западного ис-кусства, Государственного музея изобразительных искусств им.