Предложенный авторами скрининговый неинвазивный тест (адреналиновая проба) является наиболее чувствительным и информативным методом, контролирующим и прогнозирующим функциональную жизнеспособность роговицы как пластического материала.
3. Энергетический обмен в изолированных тканях в норме и при гипоксии
Основным источником энергии в клетке является глюкоза или гликоген, окисление которых происходит либо по пути цикла Кребса, либо по пути пептозного цикла. При повышении энергозатрат в клетке активируется цикл Кребса.
Активация пептозного цикла создает клетке покой, что обеспечивает сохранение ее структуры.
Между обоими метаболическими путями должно поддерживаться состояние динамического равновесия. На окислительно-восстановительные процессы в тканях влияет уровень катехоламинов. В анаэробных условиях процесс регуляции энергетического баланса в клетках затруднен.
Таблица 2
Последовательность нарушений энергетического обмена в тканях при гипоксии
Дефицит энергии в клетках ведет к нарушению свойств ее белков (ферментов), что вызывает накопление свободных радикалов, усугубляющих повреждение клеток.
При консервации тканей мероприятия по пролонгированию их жизнеспособности должны быть направлены на снижение расхода энергии и, прежде всего, потребности клеток в энергосубстратах и кислороде.
4. Пролонгирование энергетического обмена в изолированных тканях при гипоксии
В условиях нарастающего дефицита энергии в тканях при гипоксии с целью регулирования путей метаболизма необходимо обеспечить клеткам функциональный покой и, таким образом, замедлить скорость накопления энергетического долга.
При консервации донорских тканей, как известно, применяются различные фармакологические препараты. Оценка их влияния на жизнеспособность тканей проводится по мембранной проницаемости препаратов. Известны вещества, способные либо стабилизировать, либо лабилизировать клеточные мембраны, повышая их проницаемость. Лабилизация мембран наступает под влиянием средств, способствующих образованию свободных радикалов, таких, как цистеин, глютатион, витамин А. Все эти соединения вызывают необратимое набухание и лизис митохондрий, лизосом, микросом и других мембранных структур клетки. Аналогичное действие оказывают пирогенные стероиды, стрептолизин, изолейцин. В то же время противовоспалительные стероиды: гидрокортизон, кортизон, преднизолон, дексаметазон и др. оказывают на мембраны стабилизирующее влияние. В связи с этим, приемлемым считается обработка донорских тканей противовоспалительными гормонами перед основным процессом консервации. Защитным действием на клеточные мембраны тканей обладает метиленовый синий, бриллиантовый зеленый, некоторые хиноны (витамины Е и К), серотонин, ГОМК (гамма-оксимасляная кислота) и др. Механизм защитного действия ГОМК на ткани заключается в способности этой жирной кислоты образовывать соли с железом катализатором образования перекисей липидов.
Таким образом, переориентация путей метаболизма с помощью препаратов, стабилизирующих мембранные структуры клеток, ведет к пролонгированию жизнеспособности консервированных изолированных тканей.
5. Трансплантационная терминология
По существующей Международной трансплантологической терминологии различают 5 разновидностей трансплантатов: аутологичные, изогенные, аллогенные, ксеногенные и эксплантаты.
Таблица 3
Международная трансплантологическая терминология (Вена, 1967 г.)
Всеобщее признание получило применение в клинических условиях аллогенных тканей для трансплантации. Аллогенные ткани являются ценным пластическим материалом, применение их приносит в большинстве случаев положительный клинический результат. В офтальмологии из аллогенных тканей используются: роговая оболочка, аорта, твердая мозговая оболочка, перикард.
Ткани считаются полноценными, если в них сохранились первоначальные свойства (пластические, структурные, биологические). Перед трансплантацией донорские ткани нуждаются в создании определенных условий, именуемых консервированием.
При консервации тканей должны выполняться следующие условия:
1) соблюдение стерильности;
2) снижение или приостановление аутолиза;
3) сохранение пластических, структурных, биологических и функциональных свойств.
Соблюдение стерильности достигается путем применения физических или химических методов, а также соблюдением асептики и антисептики. Все это позволяет защитить донорские ткани от микробного разложения. Перед пересадкой стерильность тканей контролируется бактериологическими методами.
Замедление или приостановление аутолиза (ферментативного процесса) в тканях может быть достигнуто применением или антисептических растворов, или физических методов низкие температуры (Коваленко П.П., 1975).
С целью сохранности структуры и биологических свойств консервированных тканей при их трансплантации для получения оптимальных функциональных результатов должны быть приемлемы лишь те методы консервирования, при которых в тканях сохраняются или восстанавливаются их первоначальные качества.
В настоящее время в РФ с учетом современных достижений офтальмологии и трансплантологии, биофизики и биохимии, молекулярной биологии и патофизиологии сотрудниками ФГУ МНТК «Микрохирургия глаза»им.акад.С.Н разработана оригинальная медико-технологическая система донорской службы (С.Н. Федоров с соавт., 1993). Обоснована правовая база деятельности Глазных тканевых банков РФ. Реализована проблема легитимности забора и заготовки трупных тканей и органов человека для трансплантации в РФ, в том числе, путем издания Приказа Минздравсоцразвития России и РАМН 357/40 от 25.05.2007г. «Об утверждении Перечня органов и/или тканей человека объектов трансплантации, Перечня учреждений здравоохранения, осуществляющих трансплантацию органов и/или тканей человека и Перечня учреждений здравоохранения, осуществляющих забор и заготовку органов и/или тканей человека».